瑞典研究所加速新药研发蛋白的结合亲和力的实验方法

由于大多数药物通过与一种或多种蛋白质结合并抑制或激活其活性而起作用标靶药物，因此新药开发中最基本和最常见的实验是检测药物对靶蛋白的活性。其中，最简单、最简洁的方法是利用动力学实验原理在体外检测药物与纯化的靶蛋白的结合亲和力。因为大多数药物的作用靶点在细胞内，不同化合物进入细胞的能力受细胞膜通透性、膜转运蛋白等多种因素的影响。因此，检测药物对细胞内靶蛋白的作用通常是通过检测靶标下游的分子生物学反应。以 Pär 为首的瑞典研究机构团队基于提高蛋白质和药物的热稳定性，首次开发了一种名为 Cell Shift Assay（缩写：CETSA）的实验方法，可直接用于细胞内或组织结合的检测药物与靶蛋白的亲和力。它为直接检测细胞或组织中的药物-靶蛋白相互作用、跟踪药物迁移、脱靶效应和耐药性开辟了一条新途径。该研究发表在最近一期的期刊上。它为直接检测细胞或组织中的药物-靶蛋白相互作用、跟踪药物迁移、脱靶效应和耐药性开辟了一条新途径。该研究发表在最近一期的期刊上。它为直接检测细胞或组织中的药物-靶蛋白相互作用、跟踪药物迁移、脱靶效应和耐药性开辟了一条新途径。该研究发表在最近一期的期刊上。

实验方法简单，将靶细胞和药物在固定温度下孵育一定时间，然后通过蛋白质印迹法（Blot）检测细胞质中的靶蛋白。实验不仅适用于分离的细胞质，也适用于完整的细胞以及未分离的组织样本。Pär 教授表示：“该方法适用于多种靶蛋白标靶药物，可以直接检测药物分子是否在细胞和动物模型中达到靶点，我们相信 CETSA 最终将有助于提高许多药物的疗效。药物。它可以帮助加速新药的开发，甚至有助于选择更有效的治疗方案。”

这种实验方法的主要缺点是灵敏度不够高，而且在药物浓度较高的情况下，靶蛋白的热稳定性通常会发生显着变化。